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无毒核酸凝胶电泳染料(BB-GelGreen)图片
产品货号:
SN0037
中文名称:
无毒核酸凝胶电泳染料(BB-GelGreen)
英文名称:
Safe Nucleic Acid Gel Electrophoresis Stain, BB-GelGreen
产品规格:
500μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

BB-GelGreen是一种安全性高、高灵敏的新型核酸染料,适用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的dsDNA、ssDNA和RNA染色。本制品独特的油性大分子结构,使其不能穿透细胞膜进入活体细胞内,也不易挥发而被吸入人体。AMES实验显示在凝胶染色浓度下没有诱变性,使用安全性高、灵敏度高,可以替代溴化乙锭作为各种核酸电泳的染色剂。


BB-GelGreen可兼容可见光激发的凝胶观察装置和标准紫外凝胶成像系统,适用于蓝色可见光激发的凝胶观察装置和紫外凝胶成像系统。



产品特点:
  • 安全性高:独特的油性大分子结构,使其不能穿透细胞膜进入活体细胞内。
  • 灵敏度高:适用于各种分子量DNA电泳,对于微量的DNA具有更高的检测灵敏度。
  • 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。


适用范围:
  • 胶染法(电泳前染色)和泡染法(电泳后染色)均可。
  • 适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳。
  • 可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色。


产品组成:
组分规格
10000×BB-GelGreen500μL
说明书1份

保存:室温,避光,有效期1年。

注意事项:
  • 染料无需低温冷藏,请于室温下避光储存,避免沉淀。若出现沉淀,请将染料置于45~50℃条件下2min,振荡使充分溶解后再使用。
  • 由于BB-GelGreen的高灵敏性,建议减少DNA样品上样量,推荐已知浓度样品的上样量为50~200ng/泳道。
  • 聚丙烯酰胺凝胶电泳请使用泡染法。
  • BB-GelGreen在紫外凝胶成像系统下的检测灵敏度会比使用BB-GelRed低约4~5倍。


使用方法:
一、胶染法(电泳前染色,用法同EB)
  • 配制合适浓度的琼脂糖凝胶。
  • 用微波炉加热使琼脂糖完全融化。
  • 加入BB-GelGreen使其终浓度为1×(即100mL凝胶中加入10μL 10000×BB-GelGreen水溶液),此时溶液呈淡粉色。
  • 将含有1×BB-GelGreen染液的琼脂糖溶液倒入胶槽中,插入齿梳,室温凝固。
  • 按照常规方法进行电泳。
  • 用蓝光仪观察结果。


二、泡染法(电泳后染色)
  • 按照常规方法进行电泳。
  • 使用0.1M NaCl溶液稀释BB-GelGreen染液至3×染色液(例如将15μL 10000×BB-GelGreen水溶液加入50mL 0.1M NaCl溶液中)。
  • 将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温摇床孵育30min(对于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,需孵育30min~1h,时间随着丙烯酰胺含量增加而延长。单次使用的3×染色液可重复使用3次左右,室温避光保存)。
  • 用蓝光仪观察结果。


常见问题:
  • 使用胶染法,出现DNA条带弥散、拖尾或弯曲等现象?
    • 确保使用的染料终浓度为1×。
    • DNA上样量过多。将DNA样品上样量减少至1/3或1/5。
    • 凝胶浓度不合适。检测大片段DNA建议使用低浓度琼脂糖凝胶。
    • 样品中loading buffer过量。loading buffer中的SDS可能会影响电泳效果,建议减少loading buffer用量。
    • 使用合适的电压,建议5~10V/cm。
    • 使用新鲜的电泳缓冲液。
  • 使用胶染法发现DNA迁移率存在差异?
    • 将DNA样品上样量减少至1/3或1/5。
    • BB-GelGreen分子量较大,大分子量导致DNA的迁移速率可能受到染料与DNA比率的影响。因此不建议将BB-GelGreen直接添加到loading buffer中使用,这会导致条带迁移不准确。
    • 可使用泡染法准确确定DNA条带大小。
  • ssDNA和RNA染色效果不如dsDNA?
    BB-GelGreen对于dsDNA的灵敏度是ssDNA或RNA的5倍,可适当提高ssDNA或RNA上样量。

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